|
裸鼠人大肠癌移植模型的建立
内容提示：裸鼠是建立肿瘤模型的良好动物品系，以往大多是用能传代培养的大肠癌细胞株建立的人大肠癌裸鼠模型，本研究采用病人的肿瘤组织建立了三组人大肠癌裸鼠移植模型。大肠癌组织来源及移植方法本研究建立了三组大肠癌模型，共有三个来源。初代移植：严格无菌条件下取得癌块后剪成直径约1。5mm的小块，30分钟内接种于裸鼠颈部皮下
裸鼠是建立肿瘤模型的良好动物品系，以往大多是用能传代培养的大肠癌细胞株建立的人大肠癌裸鼠模型，本研究采用病人的肿瘤组织建立了三组人大肠癌裸鼠移植模型。
材料和方法
一.动物BALB/C(nu/nu) 裸小鼠购自中国科学院上海实验动物研究所，SPF级，鼠龄4～8周，体重15～25克，雌雄兼用，饲养于超净生物层流架内，环境定期紫外线消毒，保持恒温恒湿，笼具、饮水、垫料、饲料均经高压蒸气灭菌。实验操作均在无菌罩内进行。
二.大肠癌组织来源及移植方法
本研究建立了三组大肠癌模型，共有三个来源。A组：男性，36岁，升结肠低分化腺癌，Dukes B期，CEA(+)，ER(+);B组：男性，43岁，乙状结肠低分化腺癌，Dukes C期，CEA(+),ER(+);C组：女性，33岁，乙状结肠腺癌II级 ，Dukes C期，CEA(+),ER(-)。
初代移植：严格无菌条件下取得癌块后剪成直径约1.5mm的小块，30分钟内接种于裸鼠颈部皮下，每组接种三只。
传代移植：当皮下移植瘤长至直径约1.5cm左右时取出移植瘤，用自制切刻器，切取3mm×3mm×1.5mm瘤组织，直接切开皮肤接种于裸鼠颈部皮下作鼠间传代(每代2～3只)。
三、移植瘤生长情况及倍增时间
肿瘤植入后，定期观察肿瘤生长情况，定期用游标卡尺测量移植瘤的最大径(a)和最小径(b)，按公式V=0.4×ab2折算瘤体积。倍增时间(Td)的计算：先计算生长率K=(LnNt-LnNO)／t (No为初始体积，Nt为t时间后瘤体积)，然后按公式Td=Ln(2/k)计算倍增时间。
四、病理形态研究
取初代及每次传代的人大肠癌瘤块，用10%甲醛固定，进行常规光学显微镜病理组织学观察。
相关文章
延伸阅读
发表评论
网站图文更新
