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三苯氧胺逆转大肠癌多药耐药性的研究
2.裸鼠饲养及动物模型建立：BALB/C(nu/nu)裸小鼠购自中国科学院上海实验动物研究所，SPF级，鼠龄4～8周，体重15～25 g，雌雄兼用，饲养于超净生物层流架内，环境定期紫外线消毒，保持恒温恒湿。笼具、饮水、垫料、饲料均经高压蒸汽灭菌，实验操作均在无菌罩内进行。从我院大肠癌患者术前肠镜活检标本中检测ER及mdr1 mRNA表达，筛选3例大肠癌，其mdr1与ER表达情况分别为mdr1(+)/ER(+)、mdr1(+)/ER(-)、mdr1(-)。于手术时取得肿瘤组织，在肿瘤切断血供后30 min内接种于裸鼠颈部皮下，待各自成瘤后体积约达30 mm3时行鼠间传代， 以次代荷瘤鼠为实验用。
3.动物分组及用药：将mdr1(+)/ER(+)、mdr1(+)/ER(-)、mdr1(-)3组各自随机分成4个亚组：分别为对照组、单用DOX组、单用TAM组及DOX+TAM联用组，每小组为6只裸小鼠。TAM(每天15 mg/kg体重)用生理盐水制成混悬液后灌胃，DOX(3.6 mg/kg体重)行腹腔内注射，每一疗程中第1～7 d以TAM逐日灌胃，第7 d DOX腹腔内注射，第8～21 d不用药，第22 d开始第2个疗程。共计2个疗程。
4.观察指标及数据处理：实验开始及每个疗程结束测量肿瘤最大径(x)及最小径(y)，计算肿瘤体积(V=0.4xy2)，第2疗程末剥取肿瘤称重，并以RT-PCR检测mdr1 mRNA表达水平。不同瘤株及处理组间不同阶段瘤体积及瘤重进行比较，用q检验。mdr1(+)/ER(+)、mdr1(+)/ER(-)组实验前后mdr1 mRNA表达水平进行比较，用t检验。
结果
1.各组移植瘤的ER及mdr1表达情况与肠镜检测结果完全一致，并将治疗前测得的各组移植瘤mdr1 mRNA/β2-MG mRNA水平作为与治疗结束后比较的基值。
2.mdr1(+)/ER(+)组不同阶段瘤体积及瘤重见表1；mdr1(+)/ER(-)组不同阶段瘤体积及瘤重见表2；mdr1(-)组不同阶段瘤体积及瘤重见表3。
表1 mdr1(+)/ER(+)组鼠瘤体积与瘤重(±s)
组别
瘤体积(mm3)
瘤重(mg)
实验前
第1疗程末
第2疗程末
对照组
7.52±1.39
62.63±10.16
507.45±93.34
634.23±119.41
DOX组
7.84±1.61
57.58±8.36
465.92±72.94
581.05±89.77
TAM组
8.00±1.47
59.22±8.53
483.68±81.96
603.05±103.39
DOX+
8.64±1.38
44.37±4.02*
340.35±22.28*
425.50±28.58*
TAM组
注：与对照组比较，*P＜0.05
表2 mdrl(+)/ER(-)组鼠瘤体积与瘤重(±s)
组别
瘤体积(mm3)
瘤重(mg)
实验前
第1疗程末
第2疗程末
对照组
6.92±0.75
45.15±5.31
283.64±30.47
353.88±38.48
DOX组
7.57±0.67
47.48±4.09
295.04±21.36
367.28±28.46
TAM组
7.50±0.96
47.05±4.23
302.11±29.48
375.30±38.48
DOX+
7.00±0.82
37.55±6.76*
243.86±17.78**
302.63±23.76**
TAM组
注：与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01
表3 mdrl(-)组鼠瘤体积与瘤重(±s)
组别
瘤体积(mm3)
瘤重(mg)
实验前
第1疗程末
第2疗程末
对照组
3.37±0.29
14.53±2.30
36.42±2.77
45.48±3.92
DOX组
3.23±0.28
13.32±1.90
31.44±1.61*
39.10±2.29*
TAM组
3.45±0.43
13.39±1.18
35.47±3.50
44.57±3.74
DOX+
3.30±0.31
13.40±1.16
31.31±1.74*
38.72±2.56*
TAM组
注：与对照组比较，*P＜0.05
